病理配套試劑
? 產(chǎn)品介紹
原位雜交(FISH) 屬于固相分子雜交范疇，它是用標(biāo)記的DNA或 RNA 為探針在原位檢測(cè)組織細(xì)胞內(nèi)特定核酸序列的方法。它不僅保持了細(xì)胞固有形態(tài)而且對(duì)被測(cè)物準(zhǔn)確定位。因此 FISH 已被廣泛應(yīng)用于腫瘤的鑒定，預(yù)后分析及相關(guān)學(xué)科的研究之中。固定是石蠟切片過(guò)程的第一步，也是在整個(gè)過(guò)程中無(wú)法補(bǔ)救的一步。固定液是通過(guò)與組織內(nèi)的某些蛋白質(zhì)成份發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)以達(dá)到抑制組織自溶，也因此使組織結(jié)構(gòu)的三維構(gòu)象發(fā)生異常改變，出現(xiàn)空間障礙而影響抗原或特定核酸序列的暴露，繼而影響組織化學(xué)或雜交的結(jié)果。不同固定液與組織的反應(yīng)方式不同，固定組織后所形成的結(jié)合物不同，故對(duì)FISH的影響不同。
? 技術(shù)原理
直接法原位雜交技術(shù)通過(guò)熒光或酶標(biāo)記的探針與目標(biāo)核酸序列直接結(jié)合。探針在細(xì)胞或組織切片中與目標(biāo)DNA或RNA序列特異性雜交后，利用熒光顯微鏡或酶底物顯色反應(yīng)直接觀察信號(hào)。因?yàn)樘结槺旧韼в袡z測(cè)標(biāo)簽，無(wú)需使用二級(jí)抗體，實(shí)驗(yàn)流程簡(jiǎn)化，適合快速檢測(cè)和定位特定基因或RNA分子的表達(dá)。
間接法原位雜交技術(shù)中，探針本身并不帶有檢測(cè)標(biāo)簽，而是通過(guò)與已標(biāo)記的二級(jí)抗體結(jié)合來(lái)間接放大信號(hào)。探針與目標(biāo)核酸序列特異性結(jié)合后，二級(jí)抗體（標(biāo)記了過(guò)氧化物酶，POD）與探針結(jié)合，并通過(guò)過(guò)氧化氫-底物反應(yīng)產(chǎn)生可見(jiàn)的顏色或熒光信號(hào)。由于二級(jí)抗體可以放大信號(hào)，靈敏度較高，適用于低表達(dá)量的基因或RNA的檢測(cè)。
? 直觀對(duì)比
? 載基定制原位雜交試劑盒優(yōu)勢(shì)
1.高特異性和靈敏度：精確檢測(cè)靶核酸序列；
2.多重檢測(cè)：可同時(shí)檢測(cè)多個(gè)目標(biāo)序列；
3.操作簡(jiǎn)便：提供完整步驟說(shuō)明，易于操作；
4.廣泛適用：適用于多種樣本類型；
5.定制探針：支持個(gè)性化探針設(shè)計(jì)，滿足不同研究需求；
6.快速顯色：優(yōu)化雜交條件，快速獲得清晰信號(hào)。
? 染色實(shí)例
